發(fā)布日期：2025/06/11

以下是生化實驗中常用試劑的分類及用途總結(jié)，結(jié)合實驗安全與操作要點，供實驗參考：

 一、基礎化學試劑  

  1. 酸堿類試劑  
    鹽酸（HCl）、氫氧化鈉（NaOH）    
      作用  ：調(diào)節(jié)溶液pH值，配制緩沖液。  
      應用  ：細胞裂解液、酶反應體系的pH調(diào)控。

 
    硫酸（H?SO?）、乙酸（CH?COOH）    
      作用  ：強酸/弱酸，用于沉淀蛋白、調(diào)節(jié)酸性環(huán)境。  
      應用  ：蛋白質(zhì)變性實驗、DNA提取中的酸性條件設置。  

  2. 鹽類試劑  
    氯化鈉（NaCl）    
      作用  ：維持滲透壓，促進蛋白溶解或沉淀。  
      應用  ：DNA提取中的鹽溶液（如TE緩沖液含NaCl）、細胞培養(yǎng)液。  

    氯化鉀（KCl）、氯化鎂（MgCl?）    
      作用  ：提供離子環(huán)境，激活酶（如Mg²?是DNA聚合酶的輔因子）。  
      應用  ：PCR反應體系、酶活性測定實驗。

  3. 有機溶劑  
    乙醇（Ethanol）、異丙醇（Isopropanol）    
      作用  ：沉淀核酸、蛋白，固定細胞，消毒。  
      應用  ：DNA/RNA提取中的沉淀步驟、實驗器材消毒。  

    丙酮（Acetone）、二甲亞砜（DMSO）    
      作用  ：溶解脂類、難溶性化合物（如DMSO溶解PCR引物）。  
      應用  ：脂質(zhì)提取、細胞凍存液（DMSO作為凍存保護劑）。  

 二、生物大分子研究試劑  
  1. 核酸相關試劑  
    Tris HCl緩沖液    
      作用  ：維持核酸提取液的pH穩(wěn)定（通常pH 7.5 8.5）。  
      應用  ：DNA/RNA提取試劑盒、質(zhì)粒純化。  

    乙二胺四乙酸（EDTA）    
      作用  ：螯合金屬離子，抑制核酸酶活性。  
      應用  ：DNA保存液、細胞裂解液（如TE緩沖液含EDTA）。  

    十二烷基硫酸鈉（SDS）    
      作用  ：強去污劑，裂解細胞并變性蛋白。  
      應用  ：DNA提取中的細胞裂解、SDS PAGE凝膠電泳（分離蛋白）。  

 

  2. 蛋白質(zhì)相關試劑  
     Tris HCl緩沖液（蛋白專用，pH 6.8 8.8）    
      作用  ：維持蛋白溶液的pH，防止變性。  
      應用  ：蛋白提取、Western blot實驗。  

    苯甲基磺酰氟（PMSF）    
      作用  ：絲氨酸蛋白酶抑制劑，防止蛋白降解。  
      應用  ：蛋白提取過程中保護目標蛋白。  

    考馬斯亮藍（Coomassie Brilliant Blue）    
      作用  ：與蛋白結(jié)合顯色，用于蛋白定量（Bradford法）或電泳染色。  
      應用  ：蛋白濃度測定、SDS PAGE凝膠染色。  

 三、染色與檢測試劑  
  1. 核酸染色劑  
    溴化乙錠（EB）    
      作用  ：插入DNA雙鏈，紫外下顯熒光，用于電泳檢測核酸。  
      注意  ：強致癌物，現(xiàn)多被安全替代物（如SYBR Green、GoldView）取代。  

    甲基綠（Methyl Green）、派洛寧（Pyronin）    
      作用  ：分別染色DNA（綠色）和RNA（紅色），用于細胞內(nèi)核酸定位。  
      應用  ：組織切片或細胞涂片的核酸染色。  

  2. 蛋白染色劑  
    麗春紅S（Ponceau S）    
      作用  ：可逆性染色蛋白，用于Western blot中轉(zhuǎn)膜效率驗證。  
      應用  ：膜上蛋白的快速可視化檢測。  

    銀染試劑（硝酸銀、甲醛等）    
      作用  ：高靈敏度染色蛋白，用于電泳后微量蛋白檢測。  
      應用  ：雙向電泳（2 DE）后的蛋白圖譜分析。  

  3. 細胞活性檢測試劑  
    臺盼藍（Trypan Blue）    
      作用  ：死細胞染色（活細胞拒染），用于細胞計數(shù)和存活率評估。  
      應用  ：細胞培養(yǎng)中的 viability 檢測。  

    MTT試劑（3 (4,5 二甲基噻唑 2) 2,5 二苯基四氮唑溴鹽）    
      作用  ：檢測細胞代謝活性，活細胞線粒體酶將MTT還原為紫色甲臜。  
      應用  ：細胞增殖或毒性實驗（如藥物篩選）。  

 四、緩沖液與溶液  
  1. 常用緩沖液  
    磷酸鹽緩沖液（PBS，pH 7.2 7.4）    
      成分  ：NaCl、KCl、Na?HPO?、KH?PO?  
      作用  ：模擬生理滲透壓，維持pH穩(wěn)定，用于細胞洗滌、保存。  
      應用  ：細胞培養(yǎng)、免疫組化實驗。  

    Tris 鹽酸緩沖液（Tris HCl，pH 6.8 8.8）    
      作用  ：廣泛用于核酸和蛋白實驗的pH緩沖。  
      應用  ：DNA提取、SDS PAGE凝膠配制（分離膠pH 8.8，濃縮膠pH 6.8）。  

  2. 特殊用途溶液  
    TE緩沖液（Tris EDTA，pH 8.0）    
      作用  ：溶解并保存DNA，EDTA抑制核酸酶。  
      應用  ：質(zhì)粒DNA、基因組DNA的長期儲存。  

    TAE/TBE緩沖液（用于核酸電泳）    
      成分  ：Tris、乙酸/硼酸、EDTA  
      作用  ：提供電泳電場環(huán)境，EDTA抑制核酸酶。  
      應用  ：瓊脂糖凝膠電泳分離DNA/RNA。  

 五、酶與輔酶類試劑  
    DNA聚合酶（如Taq酶、Pfu酶）    
      作用  ：催化DNA鏈合成，用于PCR擴增。  
      應用  ：基因克隆、突變檢測。  

    限制性內(nèi)切酶（如EcoRI、HindIII）    
      作用  ：識別并切割特定DNA序列，用于基因工程。  
      應用  ：質(zhì)粒構(gòu)建、DNA酶切分析。  

    辣根過氧化物酶（HRP）、堿性磷酸酶（AP）    
      作用  ：酶聯(lián)免疫吸附實驗（ELISA）或Western blot中的信號放大。  
      應用  ：抗原 抗體反應的顯色檢測（如DAB顯色）。  

 六、安全與防護注意事項  
1.   有毒試劑  ：如EB、PMSF、DMSO需在通風櫥操作，佩戴手套和護目鏡。  
2.   易燃易爆試劑  ：乙醇、丙酮遠離火源，密封保存。  
3.   強酸強堿  ：HCl、NaOH需小心操作，避免皮膚接觸，用后及時蓋緊瓶蓋。  
4.   生物危害  ：涉及病毒、細菌的實驗試劑需滅菌處理，按生物安全等級操作。